都柏林念珠菌是1995年最新报道的病原真菌,其生物学特性和基因类型有别于白念珠菌,主要从HIV阳性患者分离出。1998年9月至1999年3月,从173例0~12岁HIV阳性儿童中分离真菌。于舌根部刮取分泌物接种于Mycosel琼脂培养基室温培养,出芽酵母转种至土豆葡萄糖琼脂培养基(PDA),再转种至显色念珠菌琼脂平板37℃培养,以分离都柏林念珠菌。从1例3岁HIV阳性、无口腔损害的患儿分离出4个暗绿色的菌落。4个菌落均于PDA42℃培养48小时,玉米吐温琼脂培养基27℃培养2周观察厚壁孢子,50%生理盐水马血清盐培养基37℃做芽管试验。CANDIDA CHECK检查抗原特性及做碳源同化试验。3株都柏林菌标准株作为对照。PCR扩增核糖体大亚基的DNA片段(LSUr D1/D2)及DNA测序。核苷酸序列用遗传信息软件分析,并与标准菌株CBS7987的序列比较,进行随机多态DNA扩增分析(RAPD)。

    结果:临床分离株及对照标准株于PDA上42℃均不生长,在玉米吐温琼脂培养均产生大量厚壁孢子,芽管试验均阳性。由于自凝作用,未能测得抗原特性。通过ID32C检查密码数,临床分离株为7140-1400-15,与对照标准株及已报道的酵母密码数不同。分离株的LSRr序列与对照标准株相同。因此,临床分离株鉴定为都柏林念珠菌。4个分离菌落有相同的RAPD带型,且与标准株的主要RAPD带型基本相同。

    讨论: 42℃不生长、葡萄状的厚壁孢子、芽管试验阳性均为都柏林念珠菌的特征。因其强的自凝力,CANDIDA CHECK对鉴定都柏林念珠菌无效。碳源同化密码数与已报道的其他都柏林念珠菌不同。

    密码数7140-1400-15将纳入鉴定都柏林念珠菌的资料库。无同化海藻糖和2-酮基-D-葡萄糖酸盐的能力。临床分离株与标准株RAPD带型的不完全相同可能为地区差异所致。文献报告都柏林念珠菌主要从接受过抗真菌治疗者中分离出来,该患儿却无接受抗真菌治疗史,说明该菌可能为潜伏机会感染,也可能为经父母垂直传播,但因其父母均已去世而无法证实。